SOP文件 | 活化部分凝血活酶时间(APTT)测定凝固法操作规程及临床意义

原理：

被测血浆加入带不锈钢球的检测杯内温育后，加入激活试剂血浆开始凝固，被测血浆粘度不断增加，不锈钢球在检测杯底沿弯曲的轨道运动逐渐减慢，并且振幅减小，此振幅的变化由数学算法通过计算得到凝固时间。

方法学溯源：

37℃条件下，以白陶土激活因子Ⅻ和Ⅺ，以脑磷脂（部分凝血活酶）代替血小板，在Ca和磷脂参与下，观察贫血小板血浆凝固所需时间，即为活化部分凝血活酶时间，是内源凝血系统较敏感和常用的筛选试验。

检验目的：活化部分凝血活酶时间测定（APTT）

线性范围：20-180秒

试剂：

试剂准备:

按照试剂瓶标签上标明的量，用蒸馏水复溶APTT试剂，使用前预温到室温（20－25℃）。

标本采集及处理：

1、采血步骤

（1）登记：登记的内容包括病人的姓名、病历号、采血时间、登记编号、送检部门等。

（2）识别病人：问清病人并识别病人是至关重要的。了解近期用药情况和特殊生理状况,并记录。例如阿斯匹林、潘生丁等药物能抑制血小板聚集；口服避孕药会使血小板粘附、聚集功能、纤维蛋白原及多种凝血因子活性明显增高；当剧烈运动或输注肾上腺素时Ⅶ因子活性会快速上升。应注明。

（3）病人的体位：坐位采血；卧位采血；采血时病人的口中不准含食物、口香糖或口表等，以防意外。

（4） 选择适当的静脉，最宜采血的肘窝静脉，也可在腕，手，踝静脉采血。

2、注意事项:

（1）病人宜处于休息状态，并且在早餐前采血（乳糜血影响检测结果）。

（2）针头不应小于21GAVGE。国际推荐用21G1.5或20G1.5号针头，确保针头与空针联接牢固，以免产生泡沬。如果采血时产生泡沫，可能导致纤维蛋白原和Ⅷ因子变性。

（3）抽血时要“一针见血”，如抽血过慢或不太顺利，将会影响检测结果。

（4）取样完毕，立即与抗凝剂充分混合，混合抗凝标本时需轻微的但彻底的混匀，因为纤维蛋白在剧烈振荡混匀时可能变性,一般轻轻的翻转5至10次，要避免用力振摇，以免标本溶血影响结果。

（5）采血的注射器应是硅化玻璃或塑料注射器，并要求收集管刻度精确，所有试管应与参比管一一比较，弃去所有不符合要求的试管。

（6）不可在输液侧手臂采血，更不宜在输液针头内抽血。采血前也不要拍打静脉。

3、抗凝剂的选择:　

血液与抗凝剂的比例为9：1，并且应根据HCT调整抗凝剂比率；为了保证比例准确，推荐使用真空采血管含抗凝剂浓度为109MMOL/L的枸椽酸钠。

4、标本的送检:

（1）标本采取前先将标本编号贴在采血管上，采血后应进行核对。

（2）标本应带盖存放；存贮时间为2－8℃＜4小时；－20℃＜2周；－80℃＜6个月；因此取血后应及时送至实验室，以免检测结果受到影响。

5、标本处理

(1) 检验人员收到标本后应首先逐个检查其是否符合检验要求。如果不符合检验要求的标本需通知临床重新采血，

(2) 包括抽血量不标准（过多或过少）、目测发现采血管中存在小血丝或小血块，如果排除病人体内自身溶血的情况，人为造成的溶血标本以及重度乳糜血的标本等。

(3) 核对化验单申请检验项目，编号登记。

(4) 标本应在采集后离心，离心力为1500G，15分钟，4小时内检测。

危急报告值的处理:

凡是APTT>50S，且无使用抗凝药者。启动危急报告程序，记录电话报告临床并记录相应信息，如患者姓名、病历号、标本唯一编号、病房及床号、检验结果、报告时间（精确至分钟）、接电话人的姓名。

报告审核制度:

实验报告发出前要求：审核者需检查整个实验过程是否符合操作规程并核对相关信息方可发出报告。

1、室内质控合格

2、病人的各项信息有登记

3、报告发出时除急诊病人报告外需有检验者与审核者双签字或盖章。

临床意义:

1、APTT是内源性凝血系统的筛选试验。

2、APTT延长：

APTT结果超过正常对照10s以上即为延长。主要见于发现轻型的血友病。虽可检出因子Ⅷ：C水平低于25%甲型血友病，但对亚临床型血友病和血友病携带者敏感性欠佳。延长也可见于因子Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ缺乏症；血中抗凝物和凝血因子抑制物或肝素水平增高时；当凝血酶原、纤维蛋白原及因子Ⅴ和Ⅹ缺乏时也可延长，但敏感性略差；其他尚有肝病、DIC大量输入库存血等。

3、APTT缩短：

见于DIC，血栓前状态和血栓性疾病。

4、肝素治疗的监护  

APTT对血浆肝素的浓度很敏感，故是目前广泛应用的实验室监护指标。此时要注意APTT测定结果必须与肝素治疗范围的血浆浓度呈线性关系，否则不宜使用。一般在肝素治疗期间，APTT维持在正常对照的1.5-3.0倍为宜。

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